麻疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
通用名称：麻疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
【包装规格】
48人份／盒，96人份／盒。
【预期用途】
本产品用于体外定性检测人血清或血浆样本中的麻疹病毒IgG抗体。
麻疹是由麻疹病毒（Measles Virus，MV）引起的一种以发热、呼吸道卡他症状和全身斑丘为特征的急性病毒性传染病。人类对麻疹病毒普遍易感。该病直接由咳嗽、喷嚏等飞沫传播或接触污染物而传染，该病潜伏期为9～11天（成人潜伏期可达3周），随后出现发热，咳嗽，鼻炎及结膜炎等前驱期症状（持续3～4天）。发热24小时，症状加重。前驱期后第4～5天出现皮疹，症状达到高峰。单纯麻疹很少致人死亡，并发症是造成死亡的重要原因。最重要的并发症有支气管肺炎、中耳炎、脑炎、肠炎，95%的麻疹死亡由支气管肺炎所致。目前采用的临床或实验室诊断方法主要有：血凝抑制试验（HI）、间接血凝试验（PHA）、凝胶沉淀试验、酶联免疫吸附法（ELISA），目前酶联免疫法产品在临床上广泛应用。
【检验原理】
酶联免疫间接法原理：用麻疹病毒抗原包被微孔板，加待检者血清或血浆到板孔中，样品中存在的麻疹病毒IgG抗体特异性地与微孔板表面的麻疹病毒抗原结合，形成抗原抗体免疫复合物。洗板，除去多余物质后，加入抗人IgG抗体酶标记物，形成（抗原－抗体－二抗酶标记物）免疫复合物。洗板，除去多余的结合物，加入显色液，在酶作用下产生颜色反应，通过酶标仪测定显色反应的强弱即可定性检测待检样品中的麻疹病毒IgG抗体。 
【主要组成成分】
1. 本试剂盒包含的组份：
编号 组份名称 主要成分 使用方法 装量
    96人份／盒 48人份／盒
1 预包被麻疹病毒抗原的微孔板 微孔板中预包被麻疹病毒抗原，源于培养的天然病毒。 可拆成单孔，直接使用 96孔 48孔
2 抗人IgG抗体酶标记物 辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人IgG单克隆抗体（源于小鼠）；硼酸盐缓冲液，含0.1% Proclin-300、0.002%苯酚红、蛋白稳定剂。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
3 麻疹病毒IgG抗体阳性对照 麻疹病毒IgG抗体阳性人血清或血浆；硼酸盐缓冲液，含0.02%硫柳汞、蛋白稳定剂。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
4 麻疹病毒IgG抗体阴性对照 硼酸盐缓冲液，含牛血清白蛋白。 直接使用 1.0mL×1支 1.0mL×1支
5 麻疹病毒IgG抗体临界对照 麻疹病毒IgG抗体阳性人血清或血浆；硼酸盐缓冲液，含0.02%硫柳汞、蛋白稳定剂。 直接使用 1.8mL×1支 1.8mL×1支
6 显色液A 柠檬酸、过氧化氢。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
7 显色液B 柠檬酸、四甲基联苯胺（TMB）。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
8 浓缩洗涤液（10倍） 磷酸盐缓冲液，含0.5%Tween-20，10倍浓缩。 用蒸馏水或去离子水10倍稀释后使用 50mL×1瓶 50mL×1瓶
9 样品稀释液 硼酸盐缓冲液，含牛血清白蛋白。 直接使用 50mL×2瓶 50mL×1瓶
10 终止液 0.5 mol/L H2SO4溶液。 直接使用 6.5mL×1瓶 3.5mL×1瓶
11 密封袋 　 　 1个 1个
12 封板膜 　 　 4片 4片
13 记录纸 　 　 1份 1份
注：酶标记物、阳性对照、阴性对照、临界对照，必须使用试剂盒配备的，不能使用其它批号产品。显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液为通用试剂，可用于本公司所有ELISA试剂盒。
2. 需要但未提供的材料：
具有450nm、630nm波长的酶标仪
微孔板清洗器
5μL～40μL、40μL～200μL、200μL～1mL移液器
37℃恒温设备
微孔振荡器
【储存条件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
拆封后未用完的微孔板应放入密封袋内2℃～8℃保存。各组份拆封后应在一个月内用完。
生产日期及失效日期见标签。
【适用仪器】
具有450nm、630nm波长的酶标仪
【样本要求】
应按照临床采血技术规范操作采集血清或血浆样品。血浆样品推荐使用EDTA-K2（1.5mg/mL）、柠檬酸钠（3.2mg/mL）、草酸钠（0.01mol/L）或肝素钠（12.5IU/mL）的抗凝血浆。室温保存样品不要超过8小时；若实验在8小时以后进行，需将样品保存在2℃～8℃；如保存超过1周则保存在-20℃以下，并避免反复冻融。尽管低于一定浓度的内源性物质（胆红素、血红蛋白、甘油三酯）对本品检测结果无显著干扰，仍应避免使用黄疸、溶血或高血脂样品。明显被污染的样品不能用于检测。
【检验方法】
1. 试验过程注意事项
1.1 试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，应在室温（20℃～25℃）平衡至无潮气方可使用。拆封后未用完的包被板应放入密封袋内保存。
1.2 在储存及孵育过程中，应避免强光直接照射。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染。
1.3 为避免试剂或样品的微生物污染及交叉污染，应使用一次性吸嘴，不要重复使用。
1.4 在取用对照品和酶标记物之前应轻轻摇动使其充分混匀，加样前，使用微孔振荡器充分混匀稀释过的样品。
1.5 严格遵守规定的孵育时间和温度。如果第一孔与最后一孔加样时间间隔太长，将会导致不同的“预孵育”时间，从而影响测量值的准确性及重复性。
1.6 洗涤结束时，应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打，确保所有孔内均无残留洗涤液，避免产生泡沫。如果使用自动洗板机，应注意正确操作。
2. 试验准备
2.1 试剂盒反应试剂准备
2.1.1 微孔条
将检测所需数量的微孔条固定于板架上，剩余的微孔条放入密封袋中保存。
2.1.2 洗涤液
在干净的量筒内稀释浓缩洗涤液。50mL浓缩洗涤液加入蒸馏水或去离子水至500mL，混匀。
2.1.3 其它液体组份
直接使用，使用前应轻轻摇动使其充分混匀。
2.2 样品准备
样品1:101稀释：取5L待检样品，加入至含有0.5mL样品稀释液的小试管内，充分混匀。
3. 检测过程
3.1 每次实验每板须设空白孔1孔（若以双波长检测不设空白孔），阳性对照、阴性对照各1孔，临界对照3孔。空白孔不加样品和酶标记物，只加洗液、显色液A、显色液B和终止液；阳性对照、阴性对照、临界对照直接使用，100L/孔。其余每孔加入稀释后样品100L。置37℃±1℃孵育30分钟。
3.2 甩净孔中液体，将洗液注满每孔（约300μL/孔）后，甩净拍干，反复3次。除空白孔外每孔加酶标记物50μL，置37℃±1℃孵育30分钟。
3.3 甩净孔中液体，同上洗板3次，拍干后各孔加显色液A、显色液B各50μL，置37℃±1℃避光15分钟，每孔加入终止液50μL，轻微震荡微孔板以混合均匀。
3.4 单波长检测：以空白孔调零，用酶标仪读取450nm处的A值；
双波长检测：将酶标仪设置主波长为450nm和参考波长为630nm读取A值。
4. 参考范围
阴性对照A值＜0.10，临界对照A值平均值≥0.20，阳性对照A值≥0.80。
满足以上条件，证明实验成立，否则试验结果无效，需重新试验。 
5. 结果判定
    计算S/CO值，S/CO=样品A值/临界对照A值平均值。
反应性（R）：S/CO≥1.1
可疑（S）：0.9＜S/CO＜1.1
阴性（N）：S/CO≤0.9
【检验结果的解释】
如IgG抗体阴性，说明受检者未感染或未能成功免疫接种。如果受检者未发生急性麻疹病毒感染而IgG抗体呈反应性，则提示既往感染或免疫接种过麻疹疫苗。
【检验方法的局限性】
1. 本产品检测结果仅供临床参考，不应作为临床诊治的唯一依据，对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、流行病学、其他实验室检查（如病原学检测）等信息综合考虑。
2. 免疫功能受损或接受免疫抑制治疗的患者，如人类免疫缺陷病原体（HIV）感染患者或器官移植后接受免疫抑制治疗的患者，其血清学抗体及抗体亲合力检测的参考价值有限，可能会导致错误的医学解释。
3. 在近几个月内接受过输血或其他血液制品治疗的人群，对其阳性检测结果的分析应慎重。
4. 人血清中的异嗜性抗体可能与试剂中的Ig结合干扰试验结果，对于经常接触动物或动物血清制品的人群，应警惕可能出现的异常干扰结果。
5. 接受过小鼠单克隆抗体治疗的患者样本中，可能含有人抗小鼠抗体（human anti-mouse antibodies, HAMA）。若待测样本中含有HAMA，会影响检测结果的准确性。
6. 样品或试剂被微生物污染以及试剂的交叉污染可能导致错误结果。
7. 实验结果表明本品与交叉反应项目中所列病原体的IgG抗体阳性血清无交叉反应，但与其它病原体的交叉反应尚无实验数据。
【产品性能指标】
1. 灵敏度、特异性
本品检测1315例不同人群样本，与国外商品化的同类试剂比较，灵敏度为99.3%，特异度为99.3%。
2. 重复性和批间差
批内变异系数CV（%）不高于15%（n＝10）。
用3个批号试剂盒检测同一份低值重复性参考品，3个批号试剂盒之间的批间变异系数CV（%）不高于30%（n＝30）。
3. 检测限
    用检测限参考品进行检测，不高于0.4IU/mL。
4. 干扰试验
4.1 抗凝剂（EDTA –K2 1.5mg/mL、柠檬酸钠3.2mg/mL、草酸钠0.01mol/L、肝素钠12.5IU/mL）对本品检测结果无显著干扰。
4.2 低于一定浓度的内源性物质（胆红素0.4mg/mL、血红蛋白10mg/mL、甘油三酯20mg/mL）和抗核抗体、类风湿因子对本品检测结果无显著干扰。
4.3 纤维蛋白原对本品检测结果无显著干扰，因此本品可以检测人血清或血浆样品。
4.4 本品与风疹病毒IgG抗体、腮腺炎病毒IgG抗体、白喉IgG抗体、百日咳IgG抗体、破伤风IgG抗体、乙型肝炎表面抗体、流行性乙型脑炎IgG抗体、甲型肝炎IgG抗体、流行性脑脊髓膜炎IgG抗体、柯萨奇病毒IgG抗体、合胞病毒IgG抗体、肺炎支原体、腺病毒IgG抗体、EB病毒IgG抗体未见交叉反应。
5. 钩状（HOOK）效应
    本品无钩状效应。
【注意事项】
1. 本品仅用于体外诊断，一次性使用。
2. 用于制备本品阴性对照、阳性对照、临界对照的血清或血浆已经HBsAg、HCV抗体、梅毒螺旋体抗体和HIV抗体检测为阴性，试剂盒内其它各种组份均无生物传染性。由于不能保证检测各组份所有的传染性因素，因此本试剂盒应作为具有潜在的传染性材料对待，所有接触试剂盒的人员应按实验室规范要求进行操作。
3. 任何临床样品都应作为具有传染性样品对待。
4. 待检样品及其他潜在感染材料试验后应予以消毒。
5. 注意避免皮肤或黏膜直接接触试剂或样品。显色液中含TMB，终止液含硫酸。含TMB的试剂在试验中会诱发其它反应；含硫酸的试剂有腐蚀性。一旦接触到这些液体，应立即用水彻底清洗。
【标识的解释】
包装标签
的标识    
标识的含义 温度限制 体外诊断医疗器械 参考使用说明 不得二次使用
【参考文献】
[1] Beckford AP, Kaschula RO, Stephen C. Factors associated with fatal cases of measles: a retrospective autopsy study. S Afr Med J, 1985, 68:858~863.
【基本信息】
注册人/生产企业名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
住所：珠海市唐家湾镇港湾大道创新四路18号     
联系方式：电话号码：0756-3890858
传真号码：0756-3890848
售后服务单位名称：珠海经济特区海泰生物制药有限公司
联系方式：电话号码：0756-3890858
生产地址：珠海市唐家湾镇港湾大道创新四路18号     
生产许可证编号：粤食药监械生产许20040941号 
【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】国械注准20153401259
【说明书核准日期及修改日期】2020年8月3日